Resultados De Laboratório: Hibridização In-Situ (ISH)

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Resultados De Laboratório: Hibridização In-Situ (ISH)
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Vídeo: Técnica de Hibridização "in situ" - FISH / CISH / SISH 2024, Março
Anonim

Resultados de laboratório: Hibridização In-Situ (ISH)

A hibridização in situ - também conhecida como FISH (hibridização in-situ de fluorescência) ou CISH (hibridização in-situ cromógena) - é um procedimento especial de diagnóstico médico no qual o material genético de células ou tecidos do corpo é examinado. Em particular, com este método de exame, as alterações no material genético humano (DNA) podem ser usadas para esclarecer doenças hereditárias, infecciosas e tumorais.

A principal área de aplicação da hibridização in situ é a investigação diagnóstica adicional no contexto de doenças congênitas, genéticas, infecções virais de células e tecidos, doenças tumorais malignas, leucemia (doenças malignas do sangue e da medula óssea) e linfomas malignos (doenças malignas do sistema linfático).

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  • Qual é o procedimento laboratorial de hibridização in situ (ISH)?
  • Como funciona um exame FISH?
  • Para quais doenças é realizado um exame de ISH?

Qual é o procedimento laboratorial de hibridização in situ (ISH)?

A hibridização in situ é um procedimento de diagnóstico médico especial no qual o material genético das células ou tecidos do corpo é examinado diretamente nessas estruturas.

A base do material genético é uma molécula especial, altamente complexa e de cadeia longa:

o "DNA" (ácido desoxirribonucleico)

Em humanos, o material genético composto de DNA de fita dupla (duas fitas complementares) está localizado no núcleo de todas as células do corpo, sendo que todas as células do corpo de um indivíduo possuem material genético idêntico. Além disso, a composição exata da composição genética individual de cada pessoa é única - comparável à impressão digital, que também é única para cada pessoa.

Por esse motivo, o material genético também é denominado

denominado “código genético”, porque o projeto de todas as estruturas corporais de uma pessoa é, por assim dizer, criptografado, mapeado, armazenado e, posteriormente, também transmitido

Dentro dos núcleos celulares das células do corpo, o DNA está em uma ordem especial conhecida como

  • "Cromossomos" (corpos hereditários) é chamado. Os cromossomos sempre ocorrem aos pares nas células do corpo humano, sendo um herdado da mãe e o outro do pai. Nesse sentido, todas as células do corpo humano contêm um total de 46 cromossomos - 22 pares dos chamados autossomos e um par dos chamados cromossomos sexuais.
  • Os próprios cromossomos consistem em grande parte de DNA, com seções individuais da sequência de DNA sendo chamadas de “genes”, desde que possam receber uma função específica no que diz respeito à estrutura e função do corpo. A soma de todos os genes é chamada

    “Genoma” do ser humano

Usando o processo de laboratório de hibridização in situ, certas áreas do genoma podem ser visualizadas diretamente em células e tecidos. Isso significa que o material genético (DNA) se torna visível diretamente no núcleo das células e depois examinado e avaliado ao microscópio. O nome deste procedimento de laboratório é derivado deste princípio:

“In-situ” significa “diretamente na estrutura a ser examinada”

Como funciona um exame FISH?

Os seguintes componentes são necessários para realizar uma hibridização in situ:

  • um material de teste adequado (células ou amostras de tecido),
  • equipamento apropriado para a preparação das preparações de ISH e
  • um sistema de detecção (sistema de microscopia) para mostrar (tornar visível) o material genético nos núcleos das células.

Após a obtenção do material de exame, o material de células ou tecidos deve ser processado:

  • O material celular é espalhado em lâminas finas de vidro (lâminas de microscópio).
  • No caso de amostras de tecido, técnicas de preparação histológica são utilizadas para produzir espécimes em cortes delgados, que também são aplicadas em lâminas de microscópio.

Seguindo essas etapas de preparação, seguindo as etapas de desnaturação para obter DNA de fita simples, as preparações são revestidas com os chamados

"Sondas gênicas" - também são sequências de DNA de fita simples desnaturadas que se ligam às sequências alvo (se presentes no material de teste) - em outras palavras: "hibridizam"

Para que os produtos de hibridização possam ser posteriormente tornados visíveis para a avaliação, as sondas de DNA são marcadas direta ou indiretamente com corantes especiais. Quanto aos corantes, existe

  • por um lado, a coloração por fluorescência, em que microscópios especiais de fluorescência devem ser usados para avaliar as preparações correspondentes. Por este motivo, este método de coloração também é chamado

    Denota hibridização fluorescente in situ (FISH)

  • por outro lado, as sondas de DNA também podem ser coradas com cromógenos simples (corantes), e um microscópio de luz simples é suficiente para exibir e avaliar as preparações feitas dessa forma. Esta técnica é chamada

    Hibridização de cromogênio in situ (CISH)

Para quais doenças é realizado um exame de ISH?

A principal área de aplicação da hibridização in situ é o esclarecimento adicional no âmbito da

  • doenças congênitas, genéticas,
  • Infecções virais de células e tecidos,
  • doenças de tumor maligno,
  • Leucemia (doenças malignas do sangue e da medula óssea) e
  • linfoma maligno (doença maligna do sistema linfático).

Uma vez que as amostras de células ou tecidos são analisadas como material de teste na hibridização in situ, este procedimento laboratorial só pode ser realizado em instalações de laboratório citológico ou histológico devidamente equipadas.

Para obter mais informações sobre câncer, consulte Câncer.

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